Beskedet väckte kraftiga protester utanför UNRWA:s kontor i Gaza och de anställdas fackförening manade till strejk under torsdagen.
Totalt 154 anställda sägs upp på Västbanken medan 113 sägs upp i Gaza. Över 500 personer som är fast anställda kommer att tvingas gå ned på deltid.
FN-organets talesman Chris Gunness kallar det minskade amerikanska biståndet för "ett hot mot UNRWA:s existens". Organisationen har förgäves letat andra donatorer, förklarar han.
USA har betalat ut 60 miljoner dollar i bistånd till UNRWA:s budget i år, från att ha betalat 360 miljoner dollar i fjol. 65 miljoner dollar har frysts inne, pengar som USA har meddelat att man fattar beslut om senare.
President Donald Trump har motiverat beslutet med att USA ger palestinierna "hundratals miljoner dollar varje år utan någon uppskattning eller respekt i gengäld". Tjänstemän på amerikanska UD hävdar att det handlar om att man vill att andra länder ska stå för en större del av biståndet.
I dag ger UNRWA bistånd åt 5,3 miljoner registrerade palestinska flyktingar över hela Mellanöstern. Organisationen har över 20000 anställda.